死亡射手

死射小弗洛伊德·劳顿，幼年经历与母亲、哥哥爱德华和恶父共处。弗洛伊德一直认为哥哥是英雄，自己则成了罪犯。在一次母亲安排的刺杀任务中，弗洛伊德未能射杀父亲，反而失手射杀了哥哥爱德华，自此发誓苦练枪法。他的枪法之精准，被誉为世界上最好的射手和最强大的杀手。在哥谭市，他以犯罪克星的姿态出现，企图取代蝙蝠侠的地位。最终，蝙蝠侠和詹姆斯·戈登局长揭露了他成为地下世界霸主的阴谋，他被送入监狱，后成为雇佣兵。

死亡天使

死亡天使秘密观察蝙蝠侠，学习他的所有。他与死亡射手有着复杂的关系，与蝙蝠侠、瑞克·弗莱格和猫人之间有着特殊的情感联系，他们替代了他心中哥哥的形象。

毒藤女

帕米拉·莉莲·艾斯利，热爱植物的女大学生，在一次实验中被注射化学毒素，导致全身血液变为叶绿素，对所有毒素免疫，但因此终生不孕。她杀死了背叛她的杰森·伍德博士，后化身为大自然的复仇者，向哥谭市宣战。

疯帽人

杰维斯·泰奇，原神经系统专家，因爱上爱丽丝而引发嫉妒和杀意，想利用脑波装置操控她的男友自杀，并企图控制她。他被蝙蝠侠破坏计划，心理崩溃，发狂，开始绑架十几岁金发女孩，举办自己所谓的“下午茶会”，并被逮捕。

铜头蛇

阿克汉姆起源中的刺客，目标是刺杀蝙蝠侠，最终成为系列中最强力的对手之一。

丧钟

斯莱德·约瑟夫·威尔逊，年轻时加入美军，后与艾德琳结婚并怀有孩子。在越南战争中，他救出SAS成员冬青，获得青睐。在阿克汉姆起源中，他是蝙蝠侠遇到的最强对手之一。

萤火虫

加菲尔德·林恩，一名消防员，因伤后产生扭曲，痴迷于纵火，企图将哥谭市烧成灰烬。

二代罗宾

杰森陶德，小时候是罪犯之子，父母去世后成为罗宾二代，参与阿卡姆宇宙的冒险。

小丑血患者

克里斯蒂娜和约翰尼，原本是普通人，因接触小丑血而变异成像小丑的人。

人蝠

Kirk博士基因突变，变成人蝠杀死了妻子，在哥谭市飞来飞去，后被蝙蝠侠捉拿。有玩家设定情况下，人蝠会从警局逃跑，妻子的尸体消失，天花板上有“永远爱你”的字样。

卢修斯

卢修斯·福克斯，老爷公司的CEO，是蝙蝠侠最可靠的盟友。

阿克汉姆骑士

原为二代罗宾，因误解和小丑的蛊惑，成为骑士中最大的反派，后来清醒过来帮助蝙蝠侠。